在ELISA試劑盒中通常有三次加樣步聚，即加標本，加酶聯絡物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質局部濃縮，散布不均，

應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強烈振動。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然

凝聚、縮短后即可取得。ELISA試劑盒也可在板孔中參與稀釋液，然后在微型轟動器上轟動1分鐘以保證混和。通常說來，

在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超越一星期測定的需低溫冰存。

ELISA試劑盒實驗中需留心下列的細節：

　　1. 嚴格按照規定的時刻和溫度進行溫育以保證成果。一切試劑都必須在運用前到達室溫20-25℃。運用后當即冷藏保存試劑。

　　2. 洗板不正確能夠導致不的成果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔枯燥掉。

　　3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

　　4. 底物顯色液應呈無色或很淺的色彩，現已變藍的底物液不能運用。

　　5. 防止試劑和標本的穿插污染以免形成錯誤成果。

　　6. 在儲存和溫育時防止強光直接照射。

　　7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

　　8. 任何反響試劑不能觸摸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會損壞試劑盒中反響試劑的生物活性。

　　9. 不能運用過期產品。

　　10. 假如可能傳播疾病，一切的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測設備。