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Bst 4.0 LowSalt Red Bead試劑

簡要描述:Bst 4.0 LowSalt Red Bead試劑,雅吉生物細(xì)胞ATCC引種,代次靠前,細(xì)胞活率高狀態(tài)好,售后完善,更多細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,elisa試劑盒歡迎新老客戶咨詢訂購

  • 產(chǎn)品型號:A3828-01R
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-10-31
  • 訪  問  量:499

詳細(xì)介紹

Bst 4.0 LowSalt Red Bead試劑為全體系凍干微球制品,內(nèi)含恒溫擴增所用

的低緩沖鹽(Low Salt)、Mg

2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA

聚合酶、紅黃 pH 變色染料。由于 LAMP 在反應(yīng)時會產(chǎn)生

大量的 H+,導(dǎo)致反應(yīng)體系 pH 下降,因此,低緩沖鹽體

系條件下,可搭配 pH 敏感染料實現(xiàn)可視化檢測 LAMP 檢

測。該制品中包含低濃度的 Tris(pH8.8)緩沖鹽。

貨 號 名 稱 規(guī)格

A3828-01R Bst 4.0 LS Red Bead 100 個

儲存:-20℃保存 2 年;室溫(25℃)保存>6 個月。

使用實例:

1. 配制反應(yīng)體系

Bst 4.0 LS Red Bead 1 粒

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到液體總量 25 μl

2. 蓋上管蓋,置于 65°C 進行反應(yīng) 20~30min。 肉眼觀

察結(jié)果,黃色為陽性,紅色為陰性。

3. 10xLAMP Primer Mix 的配制,F(xiàn)IP/BIP 分別為 16 μM、

LoopF/B 分別為 4~8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。引物的稀

釋液均使用 ddH2O(pH8.0-9.0),不能使用含有 Tris 緩

沖鹽系統(tǒng)。由于該變色方法對 pH 敏感,多數(shù)情況下引物

溶解后成酸性,因此在 10x 引物中加入終濃度 1 mM

NaOH 使引物恢復(fù)到中性 pH(~8.5),注意 NaOH 需新

鮮配制,可配制成 50-100 mM 濃度使用。

注意事項:

(1)紅黃變色反應(yīng)依賴于反應(yīng)體系中 pH 的變化來實現(xiàn),

因此模板中 Tris 鹽、NaOH 等成分對反應(yīng)有至關(guān)重要的

影響。在采用核酸純化的樣本檢測時,推薦使用 ddH2O

進行洗脫。

(2)關(guān)于 DEPC 水使用的特殊說明:由于 DEPC 處理過

的 ddH2O 顯示很強的酸性,會直接導(dǎo)致溶解后的凍干球

成黃色。所以 DEPC 處理過的 H2O 必須經(jīng) NaOH 溶液調(diào)

整 pH 到 8.0-9.0 后方可使用。我們推薦直接使用,水機

制備的 18.2Ω H2O,不影響 RNA 樣本的擴增。

(3)在對粗制樣本進行檢測時,最佳的粗制樣本為拭孖

樣本,拭孖樣本經(jīng) ddH2O 浸泡后,可以直接使用浸泡液

作為模板進行擴增,無需核酸純化步驟。

(4)關(guān)于 LAMP 成品試劑的建議, Bst 4.0 LS 凍干球

為室溫穩(wěn)定狀態(tài),可長期保存。將擴增引物于 70°C 烘干,

再加入一粒凍干球即可制備成全體系檢測試劑。


源性成分.png

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